如何使用基因工程的方法合成人胰岛素

一、如何使用基因工程的方法合成人胰岛素

1获得人的胰岛素基因

使用内切酶将目的基因从原DNA中分离从DNA中提取胰岛素基因，获得人的胰岛素基因

2提取质粒

使用细胞工程 培养大肠杆菌，从大肠杆菌的细胞质中提取质粒，

3将目的基因导入质粒经行基因重组

使用内切酶（与目的基因有相同粘性末端的内切酶）将质粒切开，再使用DNA连接酶将目的基因与质粒缝合，形成一个能表达出胰岛素的基因的重组质粒

4将重组质粒导入到受体细胞中

杆菌的培养液中加入含有Ca+的物质，如CaCl2。这使细胞变成感受态细胞。这样的细胞会吸收外源基因。 此时将重组的质粒也放入培养液中， 大肠杆菌便会将重组质粒吸收。

5目的基因在受体细胞中表达

在大肠杆菌内，质粒通过表达转录与翻译后，通过大肠杆菌的大量繁衍，便可大量生产出胰岛素。

二、双向薄层层析法介绍

将展开剂按比例混合加入层析缸 , 展开剂的量以淹没薄板8～10 mm 为宜。第一相展开结束后 , 取出薄板放置一段时间 , 使展开剂自然挥发。进行第二相展开。两相前沿垂直成直角。

三、薄层层析为什么不能浸样点并要盖盖

斑点随着溶剂上行展开是要扩散的。初始斑点过大，展开后会与其他斑点重合，影响实验准确性。

还会产生拖尾，影响实验精度。

对于多成分物质，斑点会重叠的很严重。

四、胰岛素预混50和预混30什么区别.可以混用吗

诺和灵50R是含有50%短效R，和50%中效N，针对餐后血糖升高，基础血糖还可以的患者

诺和灵30R，是含有30%短效R和70%中效N，针对餐后血糖和基础血糖相差值不是很大的患者，可以说，强调一些基础血糖的控制

目前还有胰岛素类似物诺和锐30，很有效的控制餐后血糖和基础血糖，最重要的是可以在注射以后就吃饭，不用像人胰岛素需要在注射以后等待半个小时再吃饭，更方便灵活。

五、重组人胰岛素是干什么用的？

糖尿病。

人工合成的重组胰岛素相比动物胰岛素，不容易产生抗体，胰岛素利用率比较高，有利于控制血糖。

六、重组人胰岛素注射液r是短期药吗

重组人胰岛素分短效（R表示）、中效（N表示），和预混（是短效和中效按比例混合到一起，如30%的短效，70%的中效称为30R、短效和中效均为50%时称为50R）三类。因此重组人胰岛素注射液R是短效胰岛素。